实验步骤:
Day 1 .用包被液(启达生物:SD0044)预铺六孔板,500µL-1ml/孔,以底面全部浸没为主,4℃过夜后,PBS 洗3遍,再用 1% BSA于37 ℃封闭1h,PBS清洗3遍;
Day 2.将培养好的细胞消化下来,用1ml完全培养基重悬细胞,用血球计数板计数,调整浓度为5*10^5cells/mL,分别接种于预铺包被液的6孔板中,每个孔2*10^5cells,每组设3个复孔,每孔加1ml无抗培养基,37℃孵育1-8h(孵育时间以细胞正常培养时贴壁的速度参考);孵育时间到后,再使用PBS洗去未黏附的细胞。
检测:
5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS洗3遍;0.1%的结晶紫染色,室温静止0.5 h,PBS洗3遍,每孔加入500μL 10%的乙酸,5~10 min后用酶标仪检测595 nm的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少。
可别小看了细胞粘附实验,它无处不在,可用于药物开发与筛选、肿瘤生物学研究、组织工程与再生医学细胞间相互作用研究、疾病模型和病理研究、免疫学研究、细胞迁移与伤口愈合研究、血管生成研究等等。
相关产品:
SD0044细胞包被液
启达生物的包被液,主要由纤连蛋白,明胶,和2种促细胞贴壁的基质组成:
1.它成分明确,使用简单,无需配制和稀释直接加入培养瓶,细胞接种面需全部浸没后静止4-5分钟吸出晾至培养瓶表面干燥即可。
2.它包含多种组分不是单独纤连蛋白和单独的明胶溶液所能达到的效果滴。
3.它适合多种细胞和实验,不需要您每养种细胞就要准备一种特殊的包被液。